Этиология и патогенез атеросклероза. Экспериментальные модели Рекомендованный список диссертаций

1

В экспериментах на кроликах (n=16), была разработана модель гиперлипидемии, вызванная внутривенным введением 10%-ной эмульсии Липофундина в дозе 0,5 мл/кг в течение 30 дней. Экспериментальная модель характеризовалась увеличением уровня триглицеридов и ЛПОНП в 1,4 раза, ЛПНП в 1,2 раза, снижением содержания ЛПВП в 1,4 раза в крови подопытных животных. Одновременно с изменениями липидного спектра крови у подопытных кроликов было выявлено увеличение уровня лактата и С-реактивного белка соответственно в 2,1 раза и в 13,4 раза.

гиперлипидемия

экспериментальная модель

1. Калинкин М.Н., Волков В.С., Заварин В.В. Атеросклероз: патофизиология, лечение, первичная профилактика. – Тверь: РИЦ ТГМА, 2009. – 215 с.: ил.

2. Косарев В.В., Бабанов С.А. Побочные эффекты лекарственной терапии: оценка и прогнозирование // Медицина неотложных состояний. – 2010. – № 6 [Электронный ресурс]. URL: http://urgent.mif-ua.com/archive/issue-15105/article-15118/ (дата обращения: 8.07.2011).

3. Кухарчук В.В. Лечение дислипидемии как важный фактор профилактики атеросклероза и его осложнений // Системные гипертензии. – 2007. – № 2. – С. 35–43.

4. Нечаева Г.И., Терещенко Ю.В. Профилактика липидных нарушений // Лечащий врач. – 2010. – № 2 [Электронный ресурс]. URL: http://www.lvrach.ru/2010/07/15081579/ (дата обращения: 8.07.2011).

Введение

Сердечно-сосудистая патология (ишемическая болезнь сердца, цереброваскулярные нарушения, окклюзивные заболевания периферических артерий) вывела Россию на первые позиции среди индустриально развитых стран мира по частоте заболеваемости, смертности и инвалидности трудоспособного населения. В России ежегодно более 1 млн человек умирают от сердечно-сосудистых заболеваний, из них половина - от ИБС и еще 40% от поражения мозговых сосудов . Согласно рекомендациям ВНОК 2009 г. в основе первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистых заболеваний лежат мероприятия, направленные на коррекцию основных факторов риска: низкой физической активности, курения, повышенного артериального давления, ожирения и липидных нарушений .

Нарушения липидного обмена являются одним из важнейших факторов риска развития атеросклероза. Многочисленные клинические и эпидемиологические научные исследования убедительно показали, что не только гиперхолестеринемия, а любая гиперлипидемия может способствовать возникновению и дальнейшему развитию атеросклероза . В настоящее время выделяют несколько типов гиперлипидемий. Так, например, в соответствии с общепринятой систематизацией гиперлипидемии делят на 6 типов, включая выделение подтипов IIа и IIб . Разные типы гиперлипидемий обладают различным атерогенным потенциалом, наибольшее атерогенное влияние оказывают гиперлипидемии, характеризующиеся повышением уровня общего и свободного холестерина.

В связи с тем, что современные медикаментозные способы лечения должны разрабатываться с учетом характера дислипидемии, необходимо создание новых моделей, наиболее полно соответствующих различным вариантам нарушений липидного спектра крови.

При оценке эффективности новых гиполипидемических средств используют различные экспериментальные модели гиперлипидемии. Среди них можно выделить холестериновую, генетическую, перекисную модели атеросклероза; модель А.Н. Климова и соавт. (1966, 1969), основанную на получении атеросклеротических бляшек на аорте кроликов путем парентерального введения гомологичной сыворотки от животных с экспериментальной гиперхолестеринемией и т. д. . Данные модели, вместе с рядом преимуществ, обладают и существенными недостатками, связанными с трудоемкостью и длительностью воспроизведения модели (холестериновую модель воспроизводят в течение 3-4 месяцев). Недостатком экспериментальных моделей с использованием мелких лабораторных животных (крыс, морских свинок) является невозможность забора достаточного количества крови для проведения широких биохимических исследований в течение длительного времени без вреда для подопытных животных. В этом плане кролики являются более перспективными для изучения течения экспериментального атеросклероза. Липидный и липопротеиновый спектры крови экспериментальных животных разных видов различаются, в связи с этим для более объективной оценки гиполипидемического действия новых веществ опыты рекомендуют проводить с использованием животных 2-3 видов.

Целью настоящего исследования явилась разработка модели атерогенной гиперлипидемии у кроликов.

Материалы и методы

Эксперименты выполнены на 16 беспородных кроликах обоего пола, массой 3,8±0,1 кг. Гиперлипидемию вызывали внутривенным введением 10%-ной эмульсии Липофундина (состав: соевое масло - 50 г, среднецепочные триглицериды - 50 г, фосфатиды яичного желтка - 12 г, глицерол - 25 г, вода для инъекций - 1000 мл) в дозе 0,5 мл/кг ежедневно в течение 30 дней.

Развитие гиперлипидемии контролировали по содержанию липопротеинов в плазме крови подопытных животных. Биохимические исследования выполняли еженедельно в течение всего эксперимента, забор крови осуществляли из краевой вены уха в объеме 3-4 мл.

Липидный спектр сыворотки крови (холестерин общий, триглицериды, ЛПВП) исследовали, используя реактивы производства Biocon® (Германия). Концентрацию ЛПНП, ЛПОНП и коэффициент атерогенности определяли расчетным методом.

холестерин ЛПНП

холестерин ЛПОНП

Коэффициент атерогенности рассчитывали по формуле:

Уровень лактата определяли энзиматическим методом с применением реактивов производства Biocon® (Германия).

Биохимические исследования (анализ липидного спектра и уровня лактата) выполняли на автоматическом биохимическом анализаторе Flexor Е (Vital Scientific, Нидерланды).

Концентрацию С-реактивного белка определяли методом иммуноферментного анализа, используя тест-системы производства ООО «Хема» (Россия) с аналитической чувствительностью 0,05 мг/л. Результаты иммуноферментного анализа учитывали с помощью микропланшетного мультидетектора Zenyth 1100 (Anthos, Австрия).

Для моделирования гиперлипидемии у кроликов выбрали Липофундин на основании имеющихся сведений о том, что жировые эмульсии для парентерального питания могут вызывать повышение уровня липидов в крови .

Результаты исследования были обработаны статистически с применением стандартного пакета программ «MS Excel 2007». Размер выборки для сравнительного исследования при 5%-ном уровне значимости рассчитывали с использованием программы «COMPARE 2 Version 2.57 WinPEPI 11.0».

Результаты и обсуждение

В результате проведенного исследования было обнаружено, что при внутривенном введении 10%-ной эмульсии Липофундина (0,5 мл/кг) в течение 30 дней у подопытных кроликов развивалась выраженная дислипопротеинемия, которая характеризовалась увеличением уровня триглицеридов, ЛПНП и ЛПОНП и снижением содержания ЛПВП. Достоверных изменений содержания общего холестерина в крови кроликов, получавших липофундин, в течение всего срока наблюдения обнаружено не было (таблица 1).

Таблица 1 - Изменения содержания холестерина общего, триглицеридов и липопротеинов в плазме крови кроликов при внутривенном введении Липофундина (0,5 мл/кг)

	Исследуемые показатели
	Холестерин общий
	Триглицериды

Было отмечено, что уровень триглицеридов в крови кроликов при введении Липофундина постепенно увеличивался и через 4 недели наблюдения был в среднем в 1,4 раза (p<0,05) выше, чем у интактных животных. Содержание ЛПНП и ЛПОНП в крови подопытных животных возросло на 4-й неделе исследования соответственно в 1,2 (p<0,05) и 1,4 раза (p<0,05) по сравнению с исходным уровнем. Обращает на себя внимание тот факт, что уровень ЛПВП в крови подопытных кроликов снизился уже на 2-й неделе эксперимента и через 4 недели исследования был в среднем в 1,4 раза (p<0,05) ниже, чем у интактных животных.

Следует отметить, что развившаяся под влиянием Липофундина выраженная дислипопротеинемия имела атерогенный характер, о чем свидетельствовало увеличение коэффициента атерогенности у подопытных животных с экспериментальной гиперлипидемией в среднем в 1,8 раза (p<0,05) по сравнению с интактными животными (таблица 2).

Таблица 2 - Изменения значения коэффициента атерогенности, содержания лактата и С-реактивного белка в плазме крови кроликов при внутривенном введении Липофундина (0,5 мл/кг)

	Исследуемый показатель
	Лактат, Е/л
	С-реактивный белок, мг/л

* - различия с контролем (до начала введения Липофундина) достоверны.

Одновременно с изменениями липидного спектра крови у подопытных кроликов, получавших Липофундин, было выявлено увеличение уровня лактата и С-реактивного белка соответственно в 2,1 раза (p<0,05) и в 13,4 раза (p<0,05) по сравнению с их содержанием у интактных животных. Возрастание уровня молочной кислоты в крови кроликов с экспериментальной гиперлипидемией, вероятно, свидетельствует о развитии тканевой гипоксии. С-реактивный белок, получивший свое название из-за способности вступать в реакцию преципитации с С-полисахаридом пневмококков, стимулирует иммунные реакции, в т. ч. фагоцитоз, участвует во взаимодействии Т- и В-лимфоцитов, активирует классическую систему комплемента, является высокочувствительным и быстрым индикатором повреждения тканей при воспалении, некрозе, травме. Увеличение его содержания при экспериментальной гиперлипидемии, возможно, является отражением повреждения сосудистой стенки у подопытных животных.

Таким образом, нами была разработана экспериментальная модель атерогенной гиперлипидемии у кроликов. Данная модель гиперлипидемии характеризовалась повышением уровней триглицеридов, ЛПНП и ЛПОНП. Известно, что наибольшее атерогенное влияние оказывают гиперлипидемии, относящиеся к подтипам IIа, IIб и III типу. В соответствии с фенотипической систематизацией гиперлипидемий (Д. Фредрексон, 1967) разработанная модель соответствовала типу IIб.

Данная модель гиперлипидемии у кроликов относится к наиболее атерогенным моделям, что также подтверждает увеличение коэффициента атерогенности.

Разработанная модель является удобной для поиска эффективных антиатерогенных средств, так как характеризуется простотой, надежностью и быстротой выполнения. Выраженная гиперлипидемия развивается уже через 1 месяц после начала введения Липофундина, тогда как другие экспериментальные модели гиперлипидемии у кроликов, связанные с использованием холестериновой нагрузки, требуют 3-4 месяца для моделирования.

Выводы

1. При внутривенном введении Липофундина (0,5 мл/кг) в течение 30 дней у подопытных кроликов развивались выраженные изменения липидного спектра крови, которые характеризовались увеличением уровня триглицеридов и ЛПОНП в 1,4 раза (p<0,05), ЛПНП в 1,2 раза (p<0,05), снижением содержания ЛПВП в 1,4 раза (p<0,05). Коэффициент атерогенности увеличился в среднем в 1,8 раза (p<0,05).
2. Разработанная модель гиперлипидемии у кроликов является высокоатерогенной, по фенотипической систематизации гиперлипидемий соответствует типу IIб.

Рецензенты:

• Митрохин Н.М., д.б.н., профессор, зам. директора ОАО «Всероссийский Научный центр по Безопасности Биологически Активных Веществ», Московская обл., г. Старая Купавна.
• Слюсарь Н.Н., д.м.н., профессор, директор ИП «Лаборатория профессора Слюсаря Н.Н.», г. Тверь.

Работа получена 22.08.2011

Библиографическая ссылка

Демидова М.А., Волкова О.В., Егорова Е.Н., Савчук И.А. МОДЕЛИРОВАНИЕ АТЕРОГЕННОЙ ГИПЕРЛИПИДЕМИИ У КРОЛИКОВ // Современные проблемы науки и образования. – 2011. – № 3.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=4689 (дата обращения: 01.02.2020). Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»

Differential effect of Pistacia vera extracts on experimental atherosclerosis in the rabbit animal model: an experimental study
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2917426/

Липид-обогащенные диеты и окислительный стресс являются факторами риска развития атеросклероза. Эффекты метанольных (ME) и циклогексановых (CHE) экстрактов гайки Pistacia vera, часто включаемые в средиземноморскую диету, изучались в кроличьей модели атеросклероза.

Двадцать четыре новозеландских белых кролика получали атерогенную диету (контрольная группа), дополненную ME (группа ME) или CHE (группа CHE) в течение 3 месяцев. Ранее для исследования химических профилей экстрактов были разработаны GC-MS и UHPLC LC-DAD-ESI (-) — HRMS / MS. Образцы крови на начальном и месячном уровнях липидного профиля, перекисное окисление липидов и функция печени. Аорту, миокард и печень гистологически исследовали через 3 месяца.

Группы ME и CHE имели значительно более высокий уровень ЛПВП и не значительно меньший средний уровень ЛПНП холестерина в% от исходного уровня, чем контрольная группа. Триацилглицерин был значительно выше в группе CHE против контроля. Значения MDA были значительно ниже в группе ME по сравнению с контролем и CHE. ALT и AST были значительно выше в группе CHE против Control. γ-GT был ниже в группе ME по сравнению с контролем. Толщина интимы аорты была значительно меньше в группах ME и CHE против контроля; Атеросклеротические поражения группы ME были значительно менее обширными по сравнению с контролем групп и CHE. Только у группы CHE была значительная жировая инфильтрация печени.

Во время кратковременного введения одновременно с атерогенной диетой оба экстракта P. vera были полезны для HDL-, LDL-холестерина и толщины интимы аорты. ME дополнительно представил антиоксидантный эффект и значительное уменьшение поверхностных повреждений аорты. Эти результаты показывают, что диетическое включение P. vera, в частности ее ME, потенциально выгодно при управлении атеросклерозом.

Сердечно-сосудистые заболевания являются ведущей причиной смертности в промышленно развитой части мира, основным состоянием которой является атеросклероз . Развитие и прогрессирование атеросклеротических поражений изучено широко. Было проведено множество клинических исследований в отношении диетических протоколов, таких как исследование «Семь стран» средиземноморской диеты, которое включает оливковое масло . Другие клинические исследования включали фармацевтические и хирургические вмешательства только или в комбинации . Научные свидетельства патогенеза и терапии атеросклероза в прошлом веке получили в значительной степени протоколы исследований на животных моделях.

Кролик, одна из наиболее важных моделей для изучения атеросклероза, быстро реагирует на стимуляцию атеросклеротических поражений с помощью диеты с высоким содержанием холестерина . Некоторые диетические исследования использовали эту модель, в том числе введение оливкового или рыбьего жира и различных экстрактов семян или масел, полученных из семян подсолнечника, арахиса, семян льна или фундука . Пищевая гайка, потребляемая либо отдельно, либо как ингредиент в традиционных рецептах, — это фисташковый орех из дерева Pistacia vera, который принадлежит к семейству Anacardiaceae и распространяется в центральной и юго-восточной Греции, а также в других странах Средиземноморья и Ближнего Востока. Насколько нам известно, опубликованы только исследования in vitro относительно его биологически активного воздействия на развитие атеросклероза . Поэтому мы стремились исследовать влияние введения P. vera cyclohexane (CHE) и метанольного экстракта (ME) на экспериментальную модель кроликов атеросклероза на биохимию сыворотки, а также поражение аорты, сердца и печени.

В таблице 1 показаны описательная статистика измеренных параметров 3-х групп. В таблице 2 показаны средние изменения в процентах от исходных показателей биомассы организма, липидного профиля и антиоксидантного статуса, а также общие статистические значения. В таблице 3 показаны средние изменения в процентах от исходного уровня активности ферментов печени и общие статистические значения. В таблице 4 показан морфометрический анализ аорты кроликов.

Описательная статистика: средние значения ± стандартное отклонение массы тела и биохимических параметров

Средние значения веса тела, профиля липидов и окислительного стресса в течение периода наблюдения в трех группах: контроль (атерогенная диета), ME (атерогенная диета плюс ME), CHE (атерогенная диета плюс CHE).

Все переменные представлены как среднее ± SD

Процент изменения массы тела, профиля липидов и окислительного стресса в сыворотке кролика

Медиана% изменяется от исходного уровня массы тела, липидного профиля и значений окислительного стресса в течение периода наблюдения в трех группах: контроль (атерогенная диета), ME (атерогенная диета плюс ME), CHE (атерогенная диета плюс CHE).

Значительная разница при р

b Значительная разница при p

Процент изменения активности ферментов печени в сыворотке кроликов

Медиана активности ферментов печени% изменяется от исходного уровня в течение периода наблюдения в трех группах. Группа контроля: атерогенная диета, группа ME: атерогенная диета плюс ME, группа CHE: атерогенная диета плюс CHE

Значительная разница при р

b Значительная разница при p

Общий Sig: Общая значимость, NS: Незначительное

Морфометрический анализ на аортах кролика

Результаты выражены как медиана ± SD.

Группа контроля: атерогенная диета, группа ME: атерогенная диета плюс ME, группа CHE: атерогенная диета плюс CHE

Значительная разница при р

b Значительная разница при p

Конечное среднее изменение% от базовой линии в группах Control, ME и CHE не было статистически значимым (таблица 2), хотя наблюдалось умеренное увеличение абсолютных средних значений (таблица 1).

Уровни липидов в плазме всех трех групп были сходными на исходном уровне. Среднее изменение% от базовой линии в течение периода наблюдения, описанного ниже, показано в таблице 2.

Среднее изменение% от базовой линии до 1-го месяца для групп ME и CHE было статистически достоверно выше по сравнению с контрольной группой (p = 0,01 и 0,05 соответственно).

Среднее изменение группы CHE было статистически значимо выше по сравнению с контролем групп и ME в 1-й и 2-й месяцы, тогда как группы ME и CHE имели статистически значимые более высокие значения, чем контрольная группа во 2-м (p = 0,001 и p

Среднее изменение группы CHE было статистически значительно ниже по сравнению с контрольной группой в 1-м и 2-м месяце (p

Медиана% изменения группы ME была статистически достоверно выше по сравнению с контрольной группой в 1-й и 2-й месяцы (р

Среднее изменение группы CHE было статистически значимо выше по сравнению с группой ME во 2-м и 3-м месяце (p = 0,032 и 0,012 соответственно). Более того, среднее изменение группы МЭ статистически значимо отличалось по сравнению с контрольной группой в 1-м и 3-м месяце (p

Медиана% изменения группы ME была статистически достоверно выше по сравнению с контрольной группой во 2-м месяце (p = 0,05), тогда как среднее изменение группы CHE по сравнению с контрольной группой было значительно выше во время исследования (p

Медиана% изменения значений плазмы всех групп не показывала статистически значимого увеличения за весь экспериментальный период, когда группа CHE имела более высокие значения только в 3-м месяце (p = 0,007).

Среднее изменение значений группы ME по статистике было статистически значимым ниже по сравнению с контролем групп и CHE в течение третьего месяца эксперимента (p

Макроскопические образцы аорты из группы Control и CHE показали обширные атеросклеротические бляшки, покрывающие почти всю верхнюю часть вырезанной аорты (таблица 4 и фиг.1A и 1E). Показатели группы ME показали менее обширные поражения по сравнению с группой A, а также по сравнению с группой CHE (таблица 4 и фиг.1C).

Макро- и микроскопические изображения представителей аорты у кроликов трех групп. 1A, 1C, 1E являются репрезентативными изображениями из грубых образцов аорты, принадлежащих группам Control, ME и CHE, соответственно. Стрелки указывают на образования атеросклеротических бляшек. Как показано, контрольная группа демонстрировала обширные атеросклеротические бляшки, покрывающие почти всю верхнюю часть вырезанной аорты. Группы ME и CHE проявляли менее обширные поражения по сравнению с контрольной группой, и между этими двумя группами группа ME имела наименьшее образование поражения. 1B, 1D, 1F — микрофотографии с 1A, 1C, 1E соответственно (эозин — гематоксилин, первоначальное увеличение × 100). На рисунке 1B (контрольной группы) показана уязвимая доска с множеством пенных клеток, воспаление и замечательное утолщение интимы. Рисунок 1D (группа ME) показывает вышеописанное поражение, но менее обширная (толщина интима / среды меньше, чем в 1B. Рисунок 1F (группа CHE) демонстрирует эндотелий аорты с подтверждением утолщения и многих пенных клеток, однако интима / среда Отношение меньше, чем в 1 В. Стрелки указывают ширину эндотелия.

Гистопатологические данные группы Control и CHE показали уязвимые бляшки со многими пенными клетками, воспаление и замечательное утолщение интимы (рис.1B и 1F). В группе ME обнаружены описанные выше поражения, но менее обширные (рис.1D).

Гистологическое исследование сердца не выявило значительных изменений между группами.

Гистологическое исследование печени не выявило значительных изменений между Групповым контролем и МЭ. Группа CHE показала статистически значимую жировую инфильтрацию по сравнению с контрольной группой.

Негенетический гиперлипидемический кролик — это животная модель, широко используемая при исследованиях атеросклероза. Различные уровни диетического холестерина (0,2-1,3%) были использованы для создания эксперимента экспериментально , а одновременное введение других потенциально полезных веществ изучалось в периоды, варьирующие от 8 до 14 недель .

Заводы Pistacia — это деревья или кустарники, принадлежащие Греции и другим странам Средиземноморья и Ближнего Востока. Было показано, что среди них было обнаружено, что у P. lentiscus антиоксидант , антибактериальный , печеночно-защитные и цитостатические эффекты и для предотвращения холестерина ЛПНП от окисления in vitro . Было показано, что P. terebinthus оказывает полезное действие на маточные кондиломы и меланомы кожи . На P. vera было проведено мало исследований. Сообщалось, что он обладает противогрибковыми эффектами растений . P. vera ME содержит небольшие количества катехина, полифенольного флавоноида, который показывает потенциально более высокую антиоксидантную активность, чем аскорбиновая кислота и α-токоферол в исследованиях in vitro . Катехин и его продукты также были указаны как факторы снижения риска сердечно-сосудистых заболеваний путем снижения уровня холестерина в сыворотке, уменьшения агрегации тромбоцитов и снижения артериального давления .

В настоящем исследовании мы исследовали влияние совместного введения P. vera на прогресс индуцированного холестерином атеросклероза модели животного кролика в течение 12 недель. Мы решили отдельно управлять ME или CHE P. vera в разных группах животных, чтобы иметь возможность идентифицировать, какие компоненты будут отвечать за потенциально разные результаты. Анализ GC-MS CHE показал, что его основными соединениями являются b-ситостерол, сквален, стигмастерин, олеиновая и пальмитиновая кислоты. Клинические испытания уже показали защитные эффекты таких растительных стеролов при развитии ишемической болезни сердца . Кроме того, анализ МЭ с использованием методов LC-HRMS / MS выявил присутствие галлового метилового эфира, протокатехиновой кислоты и галловой кислоты. Показано, что галлова кислота обладает антиатерогенной активностью .

Результаты настоящего исследования показывают положительный эффект совместного введения P. vera ME и CHE в обогащенной холестерином диете при изменениях HDL-C. ME также продемонстрировало меньшее изменение MDA от исходного уровня, тем самым проявляя мягкий антиоксидантный эффект. Благоприятный эффект ЛПНП-С не был статистически значимым. Другие исследованные биохимические параметры (TC, TAG и ферменты печени) не продемонстрировали положительного эффекта ME при анализе данных с использованием средних средних значений. Анализ наших данных с использованием средних абсолютных значений показал статистически значимый защитный эффект МЭ по вышеуказанным параметрам (табл. 1). Однако из-за отсутствия нормального распределения значений, использование непараметрического анализа (тесты Крускал-Уоллиса и Манна-Уитни) было сочтено необходимым.

Несколько растительных веществ оказывают благотворное влияние на биохимию крови у кроликов, получающих холестерин. Полифенол оливкового масла, известный как гидрокситирозол, увеличивал уровни HDL-C атерогенных кроликов с диетическим питанием . Мука из кунжута благотворно влияла на общий уровень холестерина и триглицеридов у кроликов, получавших холестерин . Кроме того, сециолаларицирезиновый диглюкозид (SDG), лигнин растений, выделенный из льняного семени при введении кроликам в течение 8 недель, приводил к уменьшению LDL-C и увеличению ЛВП-C и антиоксидантной активности , аналогично нашему исследованию. Кроме того, в другом исследовании на кроликах с использованием этанольного экстракта лизимахиоидов Hypericum Boiss var lysimachioides (Guttifera) показано статистически значимое снижение уровней MDA, а также увеличение уровней HDL-C, что согласуется с нашим исследованием .

Наши результаты показали, что лечение обоими экстрактами P. vera вызывает умеренное увеличение значений TC, хотя это не сильно отличается от контрольной группы во втором и третьем месяце введения.

Средние значения HDL-C в контрольной группе были ниже в конце эксперимента, тогда как совместное введение экстрактов P. vera (группы ME и CHE) значительно ингибировало это снижение. Учитывая, что низкий уровень HDL-C связан с более высоким риском сердечно-сосудистых заболеваний, подтверждается, что увеличение уровня HDL-C приведет к защитному эффекту против атеросклероза после длительного введения экстрактов P. vera.

Наши результаты показали значительные различия в уровнях MDA в плазме между МЭ и контрольными группами. Это говорит о том, что положительный эффект P. vera ME на некоторые липиды и аорту может быть вызван мягким антиоксидантным эффектом.

В нашем исследовании уровни ферментов печени увеличились, достигнув максимальных уровней третьего месяца во всех группах. В частности, изменения ALT и AST были увеличены в группах ME и CHE по сравнению с контролем. Как клинические, так и экспериментальные исследования показали, что повышенные АЛТ и АСТ могут быть прогностическими для развития атеросклероза . Кроме того, изменения γGT группы ME были статистически значительно ниже в третьем месяце по сравнению с контрольной группой. Это свидетельствует о положительном эффекте P. vera ME и CHE в функции желчной системы атеросклеротических животных. В исследовании Hakimoglu et al. печеночная гидропическая и липидная дегенерация была снижена в этанольном экстракте лисимахоидов Hypericum по сравнению с кроликами, получавшими только с обогащенной холестерином диетой. Этот вывод похож на наш, где гистология печени, которую я кормила кроликов, была менее затронута, чем группа холестерина (контрольная группа), хотя статистически значимой разницы не было. В частности, кролики контрольной группы страдали от повреждения печени, характеризующегося стеатозом и фиброзом, что было еще более очевидным в группе CHE.

Макроскопическое образование бляшек в группе ME было менее обширным по сравнению с контролем групп и CHE. Как и в нашем исследовании, другие исследователи отметили, что, несмотря на увеличение уровня холестерина в сыворотке после введения экстракта, результаты патологии образцов аорты могут показать улучшение атеросклероза . Aguilera et al. обнаружили, что девственные оливковое масло и рыбьего жира уменьшают развитие атеросклеротических бляшек. Было также показано, что масло орехового ореха уменьшает атеросклеротические поражения в аорте холестерина, питающегося кроликами . Кроме того, эффект введения зеленого чая, содержащий соединения, полученные из эпикатехина у кроликов, оказал благотворное влияние на артериальные атеросклеротические бляшки . Это согласуется с нашими результатами, что свидетельствует о значительном положительном эффекте P. vera ME на развитие атеросклероза аорты. В частности, группа ME продемонстрировала значительное ингибирование атеросклеротических бляшек как по их толщине, так и по ширине в просвете аорты. Это может быть связано с основными компонентами МЭ, такими как галльная кислота и катехин, которые могут быть ответственны за этот процесс ингибирования, как уже указывалось . С другой стороны, группа CHE проявляла более мягкое ингибирование атеросклероза относительно толщины бляшек, что можно объяснить наличием b-ситостерола, сквален, стигмастерола, олеиновой и пальмитиновой кислот, как показано аналогично .

Группа CHE проявила самую низкую антиоксидантную активность. Этот эффект может быть связан с обширными, но не столь сложными атеросклеротическими поражениями, наблюдаемыми в образцах аорты группы CHE, по сравнению с таковыми для группы Control и ME. Однако группа ME проявила гораздо более сильную антиоксидантную активность. Статистически значимый наблюдаемый антиоксидантный эффект МЭ, очевидный при анализе MDA, также значительно уменьшает осаждение аортальной бляшки. С другой стороны, CHE не влиял на степень атеросклеротических поражений. Эти данные могут быть отнесены к компонентам P. vera ME, оказывающим антиоксидантную активность .

В заключение, при кратковременном введении одновременно с атерогенной диетой оба экстракта P. vera были полезны для HDL-, LDL-холестерина и толщины интимы аорты. ME дополнительно представил антиоксидантный эффект и значительное уменьшение поверхностных повреждений аорты. Эти результаты показывают, что диетическое включение P. vera, в частности ее ME, потенциально может быть полезным при лечении атеросклерозом. P. vera ME и CHE впервые используются in vivo в наших знаниях при изучении атеросклероза и показывают многообещающий эффект в отношении процесса ингибирования. Больше исследований требуется до того, как P. vera может быть клинически рекомендована для диетического включения для управления атеросклерозом.

Двадцать четыре обычных новозеландских белых кролика (2,7 ± 0,2 кг), приобретенных у греческого сертифицированного коммерческого заводчика, были случайным образом разделены на три равные группы (контроль, ME и CHE) и содержались отдельно в клетках из нержавеющей стали с бесплатным доступом к пище и водопроводной воды. Условия животного жилища составляли 20 ± 2 ° C, относительная влажность 60 ± 5%, в 12:12 ч свет: темный цикл. Животных обрабатывали в соответствии со стандартами, установленными Европейской директивой 86/609 / EEC. Местные ветеринарные органы и комитет по этике животных одобрили (лицензия № K / 950) исследование. Контрольная группа получила стандартную сбалансированную диету с кроликом (химический состав: общая жирная кислота 2,5%, целлюлоза — 18,5%, общий белок — 16,5%, вода — 13%, зола — 11%, кальций — 1,4%, лизин — 0,6%, метионин-цистин — 0,55%, фосфор 0,55%, натрий 0,25%), обогащенный 1% холестерина (Dolder, Швейцария) (атерогенная диета), группа ME получила атерогенную диету плюс ME (1% по весу) и атерогенную диету группы CHE плюс CHE (5% по массе) , Диеты были свежеприготовлены каждые три дня перед употреблением.

Количество порошкообразных фисташковых орехов на 15 кг, собранных на греческом острове Эгина, экстрагировали при комнатной температуре, сначала обезжиривали циклогексаном, получая 7,5 кг зеленого масляного остатка после выпаривания растворителя. CHE омыляли обычной процедурой, приводящей к этерифицированным жирным кислотам. Метиловые эфиры жирных кислот и неосажденный остаток анализировали с помощью GC и GC / MS с получением в качестве основных соединений b-ситостерола, сквален, стигмастерола, олеиновой кислоты и пальмитиновой кислоты (см. Дополнительный файл 1)
,

После извлечения порошкообразных фисташковых орехов циклогексаном растительный материал дополнительно экстрагировали дихлорметаном, получая 1,5 кг зеленого маслянистого экстракта, а затем метанолом с получением остатка 500 г после выпаривания растворителя. Количество 400 г остатка подвергали смоле XAD-4 для удаления сахара и получали ME, обогащенные фенольными соединениями. Для описания химического профиля обогащенного экстракта был разработан метод LC-DAD-ESI (-) — HRMS / MS. Анализ проводили с использованием устройства UHPLC, подключенного к высокоэффективному гибридному спектрометру LTQ-Orbitrap Discovery. В качестве стандартов для анализа использовались фенольные соединения, галоидный метиловый эфир (1), галловая кислота (2), протокатехиновая кислота (3) катехин (4) и эпикатехин (5), а их идентификация была выполнена путем сравнения времени удерживания, UV-Vis и высокоточные масс-спектры пиков в образце с образцами стандартных соединений.

В прилагаемом дополнительном файле 1 представлен подробный анализ компонентов экстрактов.

Все животные голодали за 12 часов до взятия крови. Они были слегка успокоены (кетамин гидрохлорид 12 мг / кг, ксилазин 2,5 мг / кг массы тела, им) для процедуры, чтобы избежать стрессового воздействия. Образцы крови из ушной артерии животных помещали в пробирки Вассермана, содержащие антикоагулянт в течение 0, 1, 2 и 3 месяца экспериментальной процедуры. Плазму отделяли центрифугированием при 3500 об / мин в течение 15 мин. Общий уровень холестерина в плазме (ТС), холестерин липопротеинов высокой плотности (HDL-C), холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C), концентрации триацилглицерина (TAG), сывороточная аланинаминотрансфераза (ALT), аспартат-аминотрансфераза (АСТ) и гамма-сыворотка активность глютамилтрансферазы (γGT) измеряли коммерческими наборами ферментативных тестов в соответствии с инструкциями производителя (Biomerieux, Lyon, France) с использованием автоматического анализатора (тип 7170A, Hitachi, Tokyo, Japan). MDA рассчитывали по ручному методу реактивных веществ тиобарбитуровой кислоты (TBARS), как описано Yagi . В конце экспериментального исследования и после последнего взятия пробы крови при седации кроликов эвтаназировали тиопенталом натрия (30 мг / кг внутривенно).

Аорта была удалена из артерии аорты в подвздошную бифуркацию. Ткани, прилипающие к адвентиции, удаляли, а аорту разрезали продольно вдоль средней вентральной стенки. Затем аорту фиксировали в 10% -ном фосфатном буферном растворе формалина. Сняли просветную поверхность каждого образца аорты, и изображение было сохранено в электронном виде. Разделы из всех образцов были получены из трех стандартных участков (непосредственно дистальных к ветви левой подключичной артерии, в седьмой межреберной артерии и непосредственно позади целиакии). Эти образцы были встроены в парафиновые блоки и окрашены гематоксилин-эозином. Гистопатологические атеросклеротические поражения аорты были классифицированы по классификации Стари , а толщина и площадь поверхности атеросклеротических поражений в стенке аорты были полуквантизированы с использованием автоматизированной системы анализа изображений . Вкратце, оцениваемые параметры: утолщение интимы, накопление пенных клеток, моноядерные инфильтраты, липидное ядро ​​и образование волокнистых колпачков. Цифровые изображения были получены из слайдов с помощью фотомикроскопа (Nikon Eclipse 80i, Nikon Corp, Токио, Япония), оснащенного цифровой камерой (Nikon DS — 2 МВт). Все изображения были перенесены на ПК с соответствующим программным обеспечением (Image ProPlus v. 5.1, Media Cybernetics, MD, USA).

Сердце и печень взвешивали и фиксировали в 10% -ном фосфатном буферном растворе формалина. Были взяты стандартные секции, встроенные в парафиновые блоки для гематоксилин-эозина, а образцы миокарда дополнительно окрашивались трихромным пятном Массона.

Повреждения миокарда оценивались от 0 до 3 относительно интерстициального отека, фиброза и инфильтратов пенных клеток. Повреждения печени были классифицированы в четырех классах, как описано ранее , в отношении изменений архитектуры, жировой инфильтрации и фиброза.

Данные были выражены как средние значения ± стандартное отклонение (SD), а также медианные значения из-за нарушения нормальности. Для анализа нормальности параметров использовался тест Колмогорова-Смирнова.

Чтобы указать тенденцию в первые 3 месяца лечения, средний процент изменений после 1, 2 и 3 месяцев переменных был рассчитан. Сравнение процентного изменения от базового значения переменных в течение периода наблюдения и переменных гистопатологии между тремя группами было проанализировано с использованием теста Крускала-Уоллиса и теста Манна-Уитни (парные сравнения).

Все тесты были двусторонними, статистическая значимость была установлена ​​при p

P.vera: Pistacia vera; ME: метанольный экстракт Pistacia vera; CHE: циклогексановый экстракт Pistacia vera; GC: газовая хроматография; МС: масс-спектрометрия; UHPLC: ультравысокая жидкостная хроматография; LC: жидкостная хроматография; DAD: детектор диодных матриц; ESI: ионизация электронного спрея; HRMS: масс-спектрометрия высокого разрешения; TC: общий холестерин; LDL-C: холестерин липопротеинов низкой плотности; HDL-C: холестерин липопротеинов высокой плотности; TAG: триацилглицерин: MDA: малоносный альдегид; ALT: аланинаминотрансфераза; АСТ: аспартатаминотрансфераза; γ-GT: гамма-глутамилтрансфераза; TBARS: реакционноспособные вещества тиобарбитуровой кислоты; SD: стандартное отклонение; SPSS: статистический пакет для социальных наук; SDG: сециолаларицирсинол диглюкозид.

КМ провела экспериментальное исследование, включающее общий обзор животных, подготовку диет, отбор проб крови, эвтаназию и составление рукописи. KG и MH подготовили экстракт циклогексана и метанола и соответствующие диеты, а также провели их анализ. GA и EP выполняли и координировали все этапы патологии образцов тканей. TK и DI участвовали в удалении тканей и подготовке рукописи. AP и AC способствовали разработке исследования. Премьер-министр провел проект по производству экстрактов пистаци. NT способствовала подготовке диет и рукописи. LAS и ID задумали дизайн исследования, скоординировали эксперименты и подготовили рукопись. Все авторы прочитали и утвердили окончательную рукопись.

Методы приготовления циклогексановых и метанольных экстрактов. Подробная информация о методологии приготовления циклогексановых и метанольных экстрактов, включая 2 рисунка.

Нажмите здесь для файла

Д-р К. Марино признателен Греческому министерству развития сельских районов и продовольствия за поддержку и образовательный отпуск, а также профессору Д. Н. Перреа за ценную консультацию и поддержку в исследовании. Д-р Дантас признает Специальный счет для исследовательских грантов (№ 70/4/2591) Национального и Каподистрианского университета в Афинах за финансовую поддержку. Авторы признают биостатистика доктора А. Галаноса за экспертный статистический анализ исследования и признают экспертную помощь К. Перреа, К. Пападаки, Э. Дуси, Г. Пантелиса, П. Рапоса и З. Мертири во время экспериментов.

В 1912 г. Н. Н. Аничков и С. С. Халатов предложили способ моделирования атеросклероза у кроликов путем введения внутрь холестерина (через зонд или посредством примешивания к обычному корму). Выраженные атеросклеротические изменения развивались через несколько месяцев при ежедневном применении 0,5 - 0,1 г холестерина на 1 кг массы тела.

Как правило, им сопутствовало повышение уровня холестерина в сыворотке крови (в 3 - 5 раз по сравнению с исходным уровнем), что явилось основанием для предположения о ведущей патогенетической роли в развитии атеросклерозагиперхолестеринемии. Эта модель легко воспроизводима не только у кроликов, но и у кур, голубей, обезьян, свиней.

У собак и крыс, резистентных к действию холестерина, атеросклероз воспроизводится путем комбинированного влияния холестерина и метилтиоурацила, который подавляет функцию щитовидной железы. Такое сочетание двух факторов (экзогенного и эндогенного) ведет к длительной и резкой гиперхолестеринемии (свыше 26 ммоль/л - 100 мг%). Добавление к пище сливочного масла и солей желчных кислот также способствует развитию атеросклероза.

У кур (петухов) экспериментальный атеросклероз аорты развивается после длительного (4 - 5 мес) воздействия диэтилстильбэстролом. В этом случае атеросклеротические изменения появляются на фоне эндогенной гиперхолестеринемии, возникающей вследствие нарушения гормональной регуляции обмена веществ.

Еще по теме Экспериментальные модели.:

1. 4.2. Основные положения кислородно-перекисноймодели «спонтанной» малигнизации
2. Десимпатизация сердца на моделях поздней клинической стадии болезни Паркинсона
3. Экспериментальные модели. Острый (диффузный) гломерулонефрит.
4. Модель нейропатической боли при введении опухолевых клеток в костные структуры
5. Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ОСНОВНЫХ ЗВЕНЬЕВ ПАТОГЕНЕЗА ХИМИОЛУЧЕВЫХ ОРАЛЬНЫХ МУКОЗИТОВ ПРИ ИХ МОДЕЛИРОВАНИИ НА МЕЛКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Рассмотрим особо проблему моделирования атеросклероза. Экспериментальная модель последнего показательна во многих отношениях.

Кролику, травоядному животному, вводится в желудочно-кишечный тракт в течение длительного периода огромное количество холестерина, т. е. фактически чуждого для него продукта питания. Но ведь на протяжении всей истории человечества продукты, содержащие холестерин, были нормальными ингредиентами питания. Огромное значение холестерина для многообразных функций организма отражается также в способности последнего синтезировать холестерин независимо от диеты, местом синтеза является, в частности, артериальная система, т. е. стенки артерий.

Чуждый для кролика продукт питания — холестерин — наводняет кровь и как инородное химическое тело, не имеющее в организме кролика адекватных ферментных систем, расщепляющих холестерин, или органов, способных выделить холестерин во внешнюю среду, в изобилии откладывается в ретикулоэндотелиальной системе и в артериальной системе, проходя ее эндотелиальный барьер. Такова общая судьба крупномолекулярных соединений (типа метилцеллюлозы, пектина, поливинилового алкоголя), не расщепляемых средствами организма и не выделяемых им.

Следовательно, с общетеоретических позиций, определяющих сущность всякой модели, получаемый у кроликов феномен имеет лишь внешнее сходство с артериосклерозом человека. Это сходство морфологическое, химическое, но не этиологическое (экологическое) и не патогенетическое.

Кроличья модель атеросклероза является, прежде всего, результатом неадекватного питания. Она не может, поэтому рассматриваться как модель человеческого атеросклероза и как модель обменных нарушений холестеринового обмена, хотя бы потому, что отложения чужеродных веществ не могут быть документацией нарушения обмена тех же веществ, так же как, например, отложения свинца в костях не документируют нарушений свинцового обмена.

И последнее: при атеросклерозе человека вопрос о нарушении холестеринового обмена решается скорее отрицательно.

Сказанное не исключает большого познавательного значения той же модели.

Последняя учит, что сосудистые барьеры — очень условное понятие и что через них могут свободно проходить крупномолекулярные соединения даже вне специальных дизорий, т. е. таких форм проницаемости сосудистых стенок, какие имеют место при отеках, воспалении. Модель подчеркивает также значение артериальной системы в улавливании всех циркулирующих химических соединений, вообще чуждых для организма или ставших таковыми в процессе, например, денатурации белковых тел (амилоидоз, гиалиноз).

Методологически важная сторона той же модели заключается еще в том, что в ней вскрывается опасность односторонних суждений, в данном случае основанных на чисто морфологической документации.

«Проблема причинности в медицине», И.В.Давыдовский

История экспериментального моделирования болезней поучительна во многих отношениях и прежде всего для решения принципиальных вопросов, связанных с этиологией. Она поучительна также и в плане общей методологии биологического эксперимента, его теоретических основ и практических выводов из него. Необходимо отдавать отчет в том, что всякая модель является известным упрощением, лишь более или менее наглядной копией оригинала, какой-то…

Всякий опыт является «насильственным испытанием природы» (И. Мюллер, Muller), ее законов. Сама «природа не нарушает своих законов» (Леонардо Да Винчи). Однако всякий опыт, всякое моделирование (инфекции, рака, гипертонии и т. д.) неизбежно сопряжено с каким-то нарушением законов и нередко с искажением последних, поскольку закон еще не известен экспериментатору и в основе соответствующих поисков лежат подчас…

Абсолютно решающего эксперимента, по-видимому, не существует, особенно в биологии, где так много неизвестных величин, затрудняющих постановку надежно контролируемого эксперимента. Если речь идет о теории, то эксперимент «не может полностью и окончательно подтвердить» ее потому, что «один и тот же результат может следовать из разных теорий». С наибольшей и все же с неабсолютной точностью эксперимент может…

Эксперимент должен отталкиваться от практики наблюдения и от тех теоретических построений которые эта практика порождает. Другими словами, сначала наблюдение, потом обобщающие мысли и идеи, из наблюдений вытекающие, и, наконец, моделирование. Следовательно, «необходимость эксперимента» вытекает из практического опыта, когда возникают и идеи и вопросы, как исходная точка для опыта (С. П. Боткин). Экспериментальный метод сам по…

Искусственное введение пневмококков кролику и получение у него пневмонии формально говорит о пневмококке как о причине инфекции. Однако хорошо известно, что пневмония обычно возникает спонтанно, т. е. аутоинфекционно, без какого-либо экзогенного заражения. Очевидно, что и сделанное заключение о пневмококке как причине или «главной причине» пневмонии годится только для указанной постановки опыта, т. е. для данной…

152. Основные проявления почечной недостаточности в полости рта.

158. Нарушения кальциево-фосфорного обмена. Гипо- и гиперкальциемия, их этиология и патогенез, основные проявления в полости рта.

162. Основные проявления эндокринопатий в полости рта.

172. Основные проявления нейрогенной дистрофии в полости рта.

1. Предмет и задачи патологической физиологии. Ее место в системе высшего медицинского образования. Патофизиология как теоретическая основа клинической медицины.

3.Определение понятия "болезнь". Стадии развития болезни, ее исходы.

5. Факторы, определяющие специфичность патологического процесса и избирательность лока­лизации основных структурно-функциональных нарушений.

6. Закономерности угасания и восстановления жизненных функций. Терминальные состояния: преагония, агония, клиническая смерть, их характеристика. Постреанимационная болезнь.

8. Принцип обратной связи в норме и патологии (и.П. Павлов, м.М. Завадовский, п.К. Ано­хин). Понятие о патологической системе, ее отличия от функциональной системы.

9. Взаимосвязь сомы и психики в норме и патологии. Роль охранительного торможения в пато­логии. Слово как болезнетворный и лечебный фактор. Медицинская деонтология. Понятие об ятрогении.

10. Взаимоотношения между местными и общими, специфическими и неспецифическими прояв­лениями болезни на примере патологии полости рта и челюстно-лицевой области.

11. Двойственная природа болезни. Движущая сила ее развития.

12. Понятие об адаптации и компенсации. Общая характеристика, виды адаптационных и ком­пенсаторных реакций.

13. Структурные основы и механизмы компенсаторно-приспособительных процессов. Понятие о "цене" адаптации и компенсации.

14. Общая характеристика патологических и компенсаторных реакций больного организма, при­меры, патогенетическая оценка.

16. Феномен стресса (г. Селье). Стресс-реализующие и стресс-лимитирующие системы. Адап­тивные и повреждающие эффекты стресс-реакции. Роль стресса в патологии.

Классификация реактивности

Индивидуальная групповая

18. Неспецифическая резистентность организма. Определение понятия; факторы, снижающие неспецифическую резистентность. Пути и средства повышения неспецифической резистентности организма.

19. Учение о конституции. Основные принципы классификации конституциональных типов. Роль конституции в патологии.

20. Иммунологическая реактивность. Понятие об иммунопатологических процессах. Иммуноде­фицитные состояния, их классификация и проявления.

21. Аллергия, определение понятия. Формы аллергических реакций. Характеристика основных форм аллергических реакций (немедленного и замедленного типа). Анафилактический шок.

22. Понятие об экстремальных факторах, экстремальных условиях существования и экстремаль­ных состояниях организма, общая характеристика.

23. Действие электрического тока на организм. Электротравма. Особенности электрического тока как повреждающего фактора.

24. Общие и местные проявления при поражении электрическим током. Патогенез электротрав­мы, причины смерти. Принципы оказания первой помощи.

25. Влияние повышенного и пониженного барометрического давления на организм. Высотная и кессонная болезнь. Дизбаризм.

26. Действие высокой температуры на организм. Гипертермия. Тепловой и солнечный удар, их патогенез.

27. Действие низкой температуры на организм. Гипотермия, ее патогенез.

28. Действие ионизирующего излучения на организм. Лучевые поражения. Общая характеристи­ка, классификация, патогенез.

Патогенез лучевых повреждений

29. Острая лучевая болезнь, патогенез, формы, исходы.

30. Костно-мозговая форма острой лучевой болезни, патогенез, клинические проявления, исходы.

31. Кишечная форма острой лучевой болезни, патогенез, проявления, исход.

32. Токсемическая и церебральная формы острой лучевой болезни, патогенез, проявления, исход.

34. Отдаленные последствия действия ионизирующей радиации. Понятие о стохастических и нестохастических эффектах ионизирующей радиации.

35. Шок. Определение понятия, виды, стадии, общие механизмы развития.

36. Травматический шок. Этиология, патогенез, стадии, проявления. Теории травматического шока.

37. Сущность и механизмы нарушений гемодинамики при шоке. Централизация и шунтирование кровотока, их патогенетическая оценка.

38. Коллапс, его виды, патогенез, отличия шока и комы.

39. Кома, ее виды, общие звенья патогенеза коматозных состояний.

40. Понятие о наследственных и врожденных болезнях. Классификация наследственных форм патологии. Роль наследственных и средовых факторов в развитии болезней. Фенокопии.

41. Понятие о пенетрантности и экспрессивности, роль в патологии.

42. Этиология наследственных форм патологии. Мутации, их виды. Понятие об антимутагенезе и антимутагенных факторах.

44. Хромосомные болезни. Трисомии: болезнь Дауна, Клайнфельтера, трисомия X, xyy, син­дром Патау. Трисомия 8, синдром Эдвардса. Кариотип, клинические проявления.

45. Хромосомные болезни. Моносомии и делеции: синдромы Шерешевского-Тернера, Вольфа-Хиршхорна, "кошачьего крика". Кариотип, клинические проявления.

46. Врожденные и наследственные пороки развития челюстно-лицевой облас­ти, общая характеристика.

47. Артериальная и венозная гиперемии. Определение понятий, классификация, этиология, патогенез, проявления, исходы.

49. Тромбоз. Определение понятия, этиология, патогенез тромбообразования, последствия и исходы тромбоза.

50. Эмболии, определение понятия, классификация, проявления и последствия эмболий. Виды эмболов.

51. Типовые нарушения микроциркуляции: вне-, внутрисосудистые, интрамуральные. Сладж, капилляротрофическая недостаточность. Этиология, патогенез, исходы.

52. Повреждение клетки. Этиология и наиболее общие звенья патогенеза повреждения клетки. Специфические и неспецифические проявления повреждения клетки.

53. Воспаление. Определение понятия, классификация. Компоненты воспаления, их общая харак­теристика. Воспаление как типовой патологический процесс. Местные и системные проявления воспаления.

54. Этиология воспаления. Первичная и вторичная альтерация при воспалении. Роль медиаторов воспаления в развитии вторичной альтерации.

55. Медиаторы воспаления, их происхождение, принципы классификации, основные эффекты. Эндогенные противовоспалительные факторы.

56. Физико-химические изменения в очаге воспаления, механизмы их развития, значение.

57. Сосудистые реакции, динамика нарушений периферического кровообращения в очаге воспа­ления, биологическое значение.

58. Экссудация, определение понятия. Причины и механизмы повышения проницаемости сосуди­стой стенки в очаге воспаления. Значение экссудации при воспалении. Виды экссудатов.

59. Стадии, пути и механизмы эмиграции лейкоцитов при воспалении. Основные хемоаттрактан­ты, обусловливающие миграцию лейкоцитов.

61. Стадия пролиферации, ее основные проявления и механизмы развития. Виды и исходы воспа­ления. Основные теории воспаления.

62. Связь местных и общих явлений при воспалении. Роль нервной, эндокринной и иммунной систем в развитии воспаления. Положительное и отрицательное значение воспаления для организма.

63. Воспалительные процессы в тканях челюстно-лицевой области. Особенно­сти их возникновения и течения.

64. Особенности изменений системы белой крови при воспалительных процес­сах в тканях челюстной-лицевой области.

65. Лихорадка. Определение понятия. Этиология лихорадки. Первичные пирогены, их виды. Роль первичных пирогенов в развитии лихорадки.

66. Патогенез лихорадки. Вторичные пирогены, их происхождение, центральные и системные эффекты. Стадии лихорадки. Изменение процессов терморегуляции в различные стадии лихорадки.

67. Изменение функций органов и систем при развитии лихорадки. Биологическое значение ли­хорадочной реакции. Понятие о пирогенной терапии.

68. Разновидности лихорадки.Типы температурных кривых.

69.Изменения функции слюнных желез и состояния ротовой полости при лихорадке.

70. Гипоксия. Определение понятия, классификация, патогенетическая характеристика различ­ных типов гипоксии.

71. Механизмы срочных и долговременных компенсаторно-приспособительных реакций при гипоксии. Адаптация к гипоксии, стадии развития. Принципы патогенетической терапии гипоксических состояний

72. Роль местной гипоксии в патогенезе воспалительных и дистрофических процессов в тканях челюстно-лицевой области. Применение гипербарической оксигенации в стоматологии.

73. Нарушения кислотно-основного состояния. Классификация ацидозов и алкалозов. Основные проявления ацидозов и алкалозов.

74. Механизмы компенсации нарушений кислотно-основного состояния. Лабораторные критерии нарушений и компенсации кислотно-основного состояния.

75. Локальное нарушение кислотно-основного баланса в области зубнога налета,его причины и роль в патогенезе кариеса.

76. Водный баланс. Виды нарушений водного баланса. Этиология, патогенез и проявления гипер- и дегидратаций.

77.Отек. Определения понятия. Классификация. Основные патогенетические факторы развития отека. Патогенез почечных, сердечных, кахектических, токсических отеков.

79.Этиология опухолей. Классификация бластомогенных агентов. Канцерогенные вещества экзо- и эндогенного происхождения. Методы экспериментального воспроизведения опухолей.

80.Значение наследственности, возраста, пола, особенностей питания, вредных привычек в возникновении и развитии опухолей.

81.Основные биологические особенности опухолей. Метастазирование опухолей механизмы, стадии. Понятие об опухолевой прогрессии.

82. Виды и основные проявления атипизма опухолевых клеток.

84.Виды и функции клеточных онкогенов, роль онкобелков в нарушении функции трансформированных клеток. Понятие об антионкогенах.

85. Взаимосвязь нарушений функций нервной и эндокринной систем с возникновением и развитием опухолей. Гормонально-зависимые опухоли.

86.Взаимосвязь нарушений функций иммунной системы с возникновением и ростом опухолей. Основные причины и проявления иммуносупрессии при раке.

87. Системное действие опухоли на организм. Паранеопластический синдром, его патогенез, основные проявления. Патогенез раковой кахексии.

88. Учение о предраковых состояниях. Облигатный и факультативный предрак. Стадии развития злокачественных опухолей. Основные принципы терапии и профилактики новообразований.

89. Голодание, его виды, периоды развития.

90. Гипо- и гипергликемические состояния. Этиология, патогенез, клинические проявления.

91. Гипер-, гипо-, диспротеинемии, парапротеинемии. Этиология, патогенез, клинические прояв­ления.

92. Гиперлипидемия: алиментарная, транспортная, ретенционная. Первичные и вторичные дис-липопротеинемии.

93. Изменения массы циркулирующей крови. Гипер- и гиповолемия. Этиология, патогенез, виды, клинические проявления.

95. Определение понятия «анемия». Этиопатогенетическая и морфо-функциональные классифи­кации анемий. Клинические проявления анемий.

96. Качественные и количественные изменения эритрона при анемиях. Регенеративные и дегене­ративные формы эритроцитов.

97. Этиология, патогенез, клинические проявления и картина крови при острой и хронической постгеморрагических анемиях.

98. Этиология, патогенез, клинические проявления и картина крови при железодефицитной и сидероахрестической анемиях.

100. Этиология, патогенез, клинические проявления и картина крови при наследственных гемоли­тических анемиях.

101. Основные проявления анемий и эритроцитозов в полости рта.

102. Лейкопении и лейкоцитозы. Этиология, виды, механизмы развития.

103. Агранулоцитоз, этиология, патогенез, виды, картина крови, клинические проявления. Панмиелофтиз, картина крови.

104. Основные проявления агранулоцитоза в полости рта.

105. Лейкозы. Определение понятия. Этиология и патогенез. Принципы классификации. Отличие лейкозов от лейкемоидных реакций. Картина крови, клинические проявления острых и хронических лейкозов.

106. Основные проявления острых и хронических лейкозов в полости рта.

107. Наследственные коагулопатии: гемофилии а и в. Этиология, патогенез, лабораторные и клинические проявления гемофилий.

108. Приобретенные коагулопатии: двс-синдром. Этиология, патогенез, клиническое течение, исходы.

109. Тромбоцитозы, тромбоцитопении и тромбоцитопатии. Классификация, этиология, патогенез, лабораторные и клинические проявления.

110. Наследственные и приобретенные вазопатии: болезнь Рандю-Ослера, Шенлейн-Геноха. Этиология, патогенез, клинические проявления.

111. Основные проявления нарушений коагуляционного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза в полости рта.???????

116. Коронарная недостаточность. Определение понятия, этиология (факторы риска), патогенез, клинические формы ибс. Некоронарогенные некрозы миокарда.

117. Основные проявления сердечно-сосудистой недостаточности в полости рта.???????????

118. Нарушение ритма сердца. Классификация аритмий. Нарушения автоматизма, экг-признаки синусовых аритмий.

I. Нарушение образования импульса

III. Комбинированные нарушения ритма

119. Нарушения возбудимости сердца. Экг-признаки экстрасистолии, пароксизмальной тахикар­дии, трепетания и мерцания предсердий и желудочков. Нарушения гемодинамики.???????????

120. Нарушение проводимости сердца. Экг-признаки атриовентрикулярной и внутрижелудочко­вых блокад.

121. Артериальные гипертензии, классификация. Симптоматические артериальные гипертензии.??????????

122. Этиология и основные теории патогенеза гипертонической болезни.

123. Клинические проявления поражения органов-мишеней при артериальной гипертензии.??????????

124. Артериальные гипотензии. Классификация. Сосудистая недостаточность кровообращения: обморок, коллапс. Их этиология и патогенез.

125. Атеросклероз, его этиология и патогенез. Роль нарушений лпнп-рецепторного взимодейст­вия в механизмах формирования атеросклеротической бляшки. Основные экспериментальные модели атеросклероза.

126. Недостаточность системы внешнего дыхания. Определение понятия, классификация. Стадии хронической дыхательной недостаточности, её клинические проявления.

127. Основные причины обструктивных и рестриктивиых нарушений лёгочной вентиляции. Изменения газового состава альвеолярного воздуха и артериальной крови при нарушении вентиляции.

128. Основные причины нарушений диффузии газов через лёгочную мембрану. Изменения газово­го состава альвеолярного воздуха и артериальной крови при нарушении диффузии.

129. Основные причины нарушения перфузии легких. Хроническая лёгочно-сердечная недоста­точность: лёгочное сердце, этиология, патогенез, клинические проявления.

130. Одышка, периодическое и терминальное дыхание. Их типы, патогенетическая характеристи­ка, механизмы развития.

131. Асфиксия. Этиология, патогенез, стадии развития.

132*. Связь нарушений внешнего дыхания и патологии челюстной-лицевой облас­ти.

133*. Нарушение пищеварения в полости рта: основные причины, механизмы развития.

134*. Нарушения жевания. Основные причины, проявления. Роль нарушения жевания в расстройствах деятельности желудочно-кишечного тракта.

136*. Нарушение функции слюнных желез. Причины и проявления гипо- и ги­персаливации.

137*. Современные представления об этиологии и патогенезе кариеса зубов.

138*. Современные представления об этиологии и патогенезе пародонтитов. Участие аутоиммунных реакций и нейрогенных дистрофий в патогенезе пародон­титов.

139*. Причины и механизмы развития нарушения глотания.

140. Основные проявления синдрома желудочной диспепсии: нарушение аппетита, тошнота, отрыжка, рвота, болевой синдром. Причины их развития.

Болевой синдром при заболеваниях жкт

141. Взаимосвязь нарушений секреторной и моторной функции желудка. Проявления гипер- и гипохлоргидрии. Патология пилорического рефлекса. Нарушение пищеварения в желудке

Расстройства секреторной функции желудка

Расстройства двигательной активности желудка

142. Язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки. Современные представления об этиологии и патогенезе язвенной болезни. Роль н. Pylori в этиологии и патогенезе заболевания.

Современные представления:

143. Нарушения моторной и секреторной деятельности кишечника и процессов всасывания. Этиология, патогенез, проявления. Нарушение пищеварения в тонкой кишке

Расстройства секреторной функции тонкой кишки

Расстройства моторной функции тонкой кишки

Расстройства всасывательной функции тонкой кишки

Расстройства функций толстой кишки

144. Кишечная аутоинтоксикация. Этиология, патогенез, проявления.

145*. Основные проявления патологии желудочно-кишечного тракта в полости рта.

146. Основные синдромы при патологии печени и желчных путей. Желтухи, виды, причины, патогенез.

147. Функциональная недостаточность печени, ее клинические проявления. Печеночная кома, основные звенья её патогенеза.

148*. Основные проявления патологии печени в полости рта.

150. Нефриты и нефротический синдром. Их этиология и патогенез, клинические проявления.

151. Острая и хроническая почечная недостаточность. Этиология, патогенез, стадии течения, клинические проявления, исходы.

При преренальной опн концентрация натрия в моче снижена в сравнении с нормой, а концентрация мочевины, креатинина и осмолярность повышена.

152*. Основные проявления почечной недостаточности в полости рта.

154. Гиперфункция аденогипофиза: гипофизарный гигантизм, акромегалия, болезнь Иценко-Кушинга, клинические проявления.

155. Патология задней доли гипофиза: проявления гипо- и гиперсекреции вазопрессина.

156. Гипер- и гипофункция щитовидной железы, основные клинические проявления.

157. Гипер- и гипофункция паращитовидных желез, основные клинические проявления.

172*. Основные проявления нейрогенной дистрофии в полости рта.

125. Атеросклероз, его этиология и патогенез. Роль нарушений лпнп-рецепторного взимодейст­вия в механизмах формирования атеросклеротической бляшки. Основные экспериментальные модели атеросклероза.

Атеросклероз - различные сочетания изменений интимы артерий, проявляющиеся в виде очагового отложения липидов, сложных сое­динений углеводов, элементов крови и циркулирующих в ней продук­тов, образования соединительной ткани и отложения кальция.

Экспериментальные модели

В 1912 г. Н. Н. Аничков и С. С. Ха­латов предложили способ моделирования атеросклероза у кроликов путем введения внутрь холестерина (через зонд или посредством при­мешивания к обычному корму). Выраженные атеросклеротические из­менения развиваются через несколько месяцев при ежедневном при­менении 0,5 - 0,1 г холестерина на 1 кг массы тела. Как правило, им сопутствует повышение уровня холестерина в сыворотке крови (в 3 - 5 раз по сравнению с исходным уровнем), что явилось основанием для предположения о ведущей патогенетической роли в развитии атеро­склероза гиперхолестеринемии. Эта модель легко воспроизводима не только у кроликов, но и у кур, голубей, обезьян, свиней.

У собак и крыс, резистентных к действию холестерина, атероскле­роз воспроизводится путем комбинированного влияния холестерина и метилтиоурацила, который подавляет функцию щитовидной же­лезы. Такое сочетание двух факторов (экзогенного и эндогенного) ведет к длительной и резкой гиперхолестеринемии (свыше 26ммоль/л-1000 мг %). До­бавление к пище сливочного масла и солей желчных кислот также способствует развитию атеросклероза.

У кур (петухов) экспери­ментальный атеросклероз аор­ты развивается после дли­тельного воздействия диэтилстильбестролом. В этом слу­чае атеросклеротические из­менения появляются на фонеэндогенной гиперхолестери­немии, возникающей вслед­ствие нарушения гормональ­ной регуляции обмена веществ.

Этиологические ф-ры :

эндогенные

1. наследственность

   пол (в возрасте 40 - 80 лет атеросклерозом и инфарктом миокарда атеросклеротической природы мужчины болеют чаще, чем женщины (в среднем в 3 - 4 раза). После 70 лет заболеваемость атеросклерозом среди мужчин и женщин примерно одинакова.)

   возраст (> 30 лет)

2. экзогенные

избыточное питание (много пищевых жиров и содержащих холестен продуктов)

1. гиподинамия

   интоксикации (алкоголь, никотин, химические в-ва)

   артериальная гипертензия (АД > 160/90)

   гормональные нарушения, болезни обмена в-в (сахарный диабет, микседема, ↓ функции половых желез, подагра, ожирение, гиперхолистеринемии)

Патогенез :

Существующие теории патогенеза атеросклероза можно свести к двум, принципиально отличающимся по своим отве­там на вопрос: что первично, а что вторично при атеросклерозе, дру­гими словами, что является причиной, а что следствием - липоидоз внутренней оболочки артерий или дегенеративно-пролиферативные изменения последней. Этот вопрос впервые был поставлен Р. Вир-ховым (1856). Он же первый и ответил на него, указав, что «при всех условиях процесс, вероятно, начинается с определенного разрыхле­ния соединительно-тканного основного вещества, из которого боль­шей частью состоит внутренний слой артерий».

С тех пор и берет свое начало представление немецкой школы па­тологов и ее последователей в других странах, согласно которому при атеросклерозе первоначально развиваются дистрофические из­менения внутренней оболочки стенки артерий, а отложение липидов и солей кальция - явление вторичного порядка. Преимуществом данной концепции является то, что она в состоянии объяснить разви­тие спонтанного и экспериментального атеросклероза как в тех слу­чаях, когда имеются нарушения холестеринового обмена, так и в тех (что особенно важно), когда их нет. Первостепенную роль авторы указанной концепции отводят артериальной стенке, т. е. субстрату, который непосредственно вовлекается в патологический процесс. «Атеросклероз является не только и даже не столько отражением общих обменных сдвигов (лабораторно они могут быть даже неуло­вимы), сколько производным собственных структурных, физических и химических превращений субстрата артериальной стенки... Пер­вичный фактор, ведущий к атеросклерозу, лежит именно в самой ар­териальной стенке, в ее структуре и в ее энзимной системе» (И. В. Да­выдовский, 1966).

В противоположность этим взглядам со времени опытов Н. Н. Аничкова и С. С. Халатова, главным образом благодаря исследованиям советских и американских авторов, успешно развива­ется концепция о роли в развитии атеросклероза общих метаболиче­ских нарушений в организме, сопровождающихся гиперхолестеринемией, гиперлипемией и гипербеталипопротеидемией. С этих пози­ций, ятердсуклррпя атеросклероз - следствие первичной диффузной инфильтрации липидов, в частности холестерина, в неизмененную внутреннюю обо­лочку артерий. Дальнейшие изменения в сосудистой стенке (явле­ния мукоидного отека, дистрофические изменения волокнистых структур и клеточных элементов подэндотелиального слоя, продук­тивные изменения) развиваются в связи с наличием в ней липидов, т. е. являются вторичными.

Первоначально ведущая роль в повышении уровня липидов, осо­бенно холестерина, в крови приписывалась алиментарному фактору (избыточному питанию), что дало название и соответствующей теории возникновения атеросклероза - алиментарной. Однако очень скоро ее пришлось дополнить, так как стало очевидным, что не все случаи атеросклероза можно поставить в причинную связь с алиментар­ной гиперхолестеринемией. Согласно комбинационной теории Н. Н. Аничкова, в развитии атеросклероза, кроме алиментарного фактора, имеют значение эндогенные нарушения липидного обмена и его регуляции, механическое влияние на стенку сосуда, изменения артериального давления, главным образом его повышение, а также дистрофические изменения в самой артериальной стенке. Однако и в этой модификации прежняя формула «без холестерина нет атеро­склероза» сохранила свой первоначальный смысл. Это обусловлено тем, что развитие атеросклероза связано в первую очередь с уровнем холестерина в сыворотке крови.

В последующие годы было показано, что для возникновения ате­росклероза имеет значение не только увеличение содержания холе­стерина в сыворотке крови, но и изменение соотношения между уров­нями холестерина и фосфолипидов (в норме 0,9). При атеросклерозе это соотношение увеличивается. Фосфолипиды снижают содержание холестерина в сыворотке крови, удерживают его в эмульгированном состоянии, препятствуют отложению в стенке сосудов. Таким обра­зом, их относительный дефицит, является одним из важных способ­ствующих факторов атерогенеза.

Не менее важную роль играет качественный состав поступающего в организм жира. Обычно 2 / 3 вводимого в организм холестерина всту­пает в химическую (эфирную) связь с жирными кислотами (главным образом в печени) с образованием холестеринэстеров. Этерификация холестерина ненасыщенными жирными кислотами (линолевой, линоленовой, арахидоновой), содержащимися в растительных маслах и рыбьем жире, способствует образованию полярных лабильных, лег­корастворимых и катаболизируемых эфиров холестерина. Напротив, этерификация холестерина насыщенными жирными кислотами, глав­ным образом животного происхождения (стеариновой, пальмитино­вой), способствует появлению труднорастворимых, легко выпадаю­щих из раствора холестеринэстеров. Кроме того, известна способность ненасыщенных жирных кислот уменьшать уровень холестерина в сыворотке крови путем ускорения его экскреции и метаболических превращений, а насыщенных- увеличивать его. Приведенные факты Позволяют заключить, что уменьшение соотношения ненасыщенных и насыщенных жирных кислот способствует развитию атеросклероза. Липиды сыворотки крови (холестерин, эфиры холестерина, фосфолипиды, триглицериды) отчасти состоят из хиломикронов (мелко­дисперсных частиц, нерастворенных в плазме) и липопротеидов - растворенных в плазме комплексов α- и β-глобулинов и липидов. α-Липопротеиды приблизительно на 33-60 % состоят из белков и на 40-67 % - из жиров, (β-липопротеиды - примерно на 7-21 % и на 79-93 % соответственно.

При атеросклерозе увеличено содержание β-липопротеидов, в пер­вую очередь с низкой удельной массой (0,99-1,023). Эти липопротеиды флотируют со скоростью 10-20 Sf, отличаются повышенным содержанием холестерина и насыщенных жирных кислот, относитель­ным дефицитом фосфолипидов, легко выпадают в осадок. Более пол­ная физическая и патофизиологическая характеристика, а также классификация типов атерогенных липопротеидов и соответствую­щих гиперлипопротеидемий проведена Фредриксоном и соавторами (1967).

Очевидно, что вид «транспорта», который обеспечивает доставку холестерина в сосудистую стенку при атеросклерозе, имеет сущест­венное значение как в механизме возникновения атеросклеротических поражений, определяя их характер и степень выраженности, так и для дифференцированной диетической и лекарственной терапии.

Кроме того, учитывая способность атерогенных β -липопротеидов после их проникновения в сосудистую стенку комплексироваться с кислыми гликозаминогликанами и гликопротеидами, приобретая антигенные свойства, допускается возможность выработки аутоантител и развитие патологического процесса по типу аутоиммунного. Этому может способствовать также появление аутоантигенов из про­дуктов распада атеросклеротических бляшек, обеспечивающих спе­цифическую сенсибилизацию организма.

В последние годы большое внимание уделяется изучению плаз­менных и тканевых ферментов, расщепляющих липиды. Установле­но, что липолитическая активность у животных, резистентных к али­ментарному холестериновому атерослерозу (крысы, собаки), повышена и, напротив, у восприимчивых к этому заболеванию животных (кро­лики, куры, голуби) - понижена.

У человека в связи с возрастом, а также при атеросклерозе липо­литическая активность стенки аорты снижается. Это дает возмож­ность предположить, что в сложной системе механизмов, способству­ющих развитию липоидоза сосудов при атеросклерозе, определен­ную роль играет недостаточность липолитических ферментов.

Большое значение в патогенезе атеросклероза имеют процессы биосинтеза холестерина. Последний в организме животных образу­ется через стадию активного ацетата (ацетил-КоА) из белков, жи­ров и углеводов. Печень является главным органом, синтезирующим холестерин в организме. Стенка сосудов также не лишена способности синтезировать холестерин из ацетата. В ней могут образовываться и фосфолипиды, и некоторые жирные кислоты. Однако сосудистая стенка не в состоянии обеспечить образование того количества липидов, которое обнаруживается в ней при атеросклерозе. Основным ис­точником их является сыворотка крови. Следовательно, развитие атеросклероза без избыточного поступления холестерина извне можно объяснить эндогенной гиперхолестеринемией, гиперлипемией и гипербеталипопротеидемией.

Приведенные выше концепции патогенеза атеросклероза имеют свои сильные и слабые стороны. Наиболее ценным достоинством кон­цепции общих метаболических нарушений в организме и первичного липоидоза артериальной стенки является наличие экспериментальной холестериновой модели. Концепция первичного значения мест­ных изменений в артериальной стенке, несмотря на то, что была вы­сказана 100 лет назад, пока не имеет убедительной экспериментальной модели.

"